脱盐柱可以重复使用吗

脱盐柱可以重复使用。

该层析柱虽是一次性使用，但是也可以重复再生使用。去离子水洗5个柱体积；0.5M氢氧化钠清洗2-3柱体积；去离子水清洗3个柱体积；再用20%乙醇洗柱5个柱体积。

分辨率高，流速适中，易收集，耐酸耐碱耐高温，具有良好的稳定性；一般生物大分子的分子量比盐等小分子大许多倍，用凝胶过滤方法为生物产品脱盐十分简单、可靠。

工作原理

利用具有网状结构的葡聚糖凝胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。

层析时，大于凝胶孔径的大分子，被阻于凝胶相外，沿着凝胶颗粒之间的间隙走，下移速度最快，故***洗脱下来，中分子物质部分进入凝胶内部，洗脱速度为其次，而小分子物质因全部进入凝胶，受到阻力***，故最后被洗脱下来，如此物质得到分离。

操作：

1、平衡：打开上下盖帽，柱里的保护液自然滴落，继续加入缓冲溶液，边滴边加，至少加3倍柱体积用来清除层析柱中的保护液。

2、进样：BC-10脱盐柱的***进样体积为2mL，样品体积不足时，可以在样品完全进入柱床体积后添加缓冲液到总体积2mL。为了增长填料的使用寿命，所用的样品推荐使用0.45微米的滤膜过滤。

3、洗脱：继续加入缓冲液进行洗脱。

DNA脱盐柱干了怎么办

1、流动相走空了，把仪器排空一下应该就可以了，柱子可参照柱说明书上的要求多冲洗一会儿，尽量用低流速，用所使用的流动相就行。

2、DNA脱盐柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，从而分离的一种层析法。

3、层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。

脱盐柱可以代替超滤嘛

不可以。脱盐柱是一款蛋白质套管，超滤是一款净水器，是两种不同的东西，所以不可以代替，超滤是以压力为推动力的膜分离技术之一。以大分子与小分子分离为目的生产的一个产品。

蛋白纯化中用到的脱盐柱的种类及原理是什么？

蛋白质分离纯化常用方法有：

1、沉淀

2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。

3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。

4、层析： a离子交换层析，利用蛋白质的两性游离。

蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段，一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其它细胞成分如DNA、RNA等分开，由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大。

扩展资料：

蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异，利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染，而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异，利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。

如果所要的蛋白主要集中在某一细胞组分，如细胞核、染色体、核糖体或可溶性细胞质等，则可利用差速离心的方法将它们分开，收集该细胞组分作为下步纯化的材料。如果碰上所要蛋白是与细胞膜或膜质细胞器结合的，则必须利用超声波或去污剂使膜结构解聚，然后用适当介质提取。

参考资料来源：百度百科-蛋白质纯化

求助Hitrap Desalting脱盐柱的用法

使用凝胶过滤介质Sephadex G10，G15，G25，G50等去除小分子，效率高，处理量可达床体积30%。只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液，就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子，简单直接。由于只是去除小分子，柱高10cm以上即可。整个过程一般可于数分钟至半小时完成。Sephadex G25系列介质专为蛋白质脱盐而设计，预装柱HiTrap Desalting（5ml）可用针筒操作。HiPrep Desalting(26ml)可在数分钟为多至10ml样品脱盐。

选择孔径很小的凝胶，在过滤时，由于蛋白质分子半径较大，所以不能进入凝胶的孔隙，很容易被洗脱，而粒子则被孔隙所吸附，较难洗脱，所以先出来的是蛋白质

pd10脱盐柱重复使用

pd10脱盐柱可重复使用。重复使用条件如下：

1、要用到2×蛋白质洗脱buffer，用量是每1ml填料使用1mlbuffer。

2、加入洗脱buffer后静置5min。

3、用5倍填料体积的去离子水冲洗柱子。

4、zui后用30%的乙醇保存在4℃条件下。

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